2×PCR Master Mix (без багрило)
PCR Master Mix е вид конвенционален PCR предварително смесен разтвор, който е готов за употреба, включително Taq ДНК полимераза, dNTP смес MgCl2 и оптимизиран буфер.По време на реакцията само праймерът и матрицата могат да бъдат добавени за амплификация, което значително опростява работните стъпки на експеримента.Този продукт съдържа отлични стабилизатори и може да се съхранява 3 месеца при 4℃.PCR продуктът има 3'-dA издатина и може лесно да бъде клониран в Т вектор.
Условия за съхранение
Продуктът трябва да се съхранява при -25 ℃ ~ -15 ℃ в продължение на две години.
Спецификации
| Верност (срещу Taq) | 1× |
| Горещ старт | No |
| Надвес | 3′-А |
| Полимераза | Taq ДНК полимераза |
| Формат на реакцията | SuperMix или Master Mix |
| Скорост на реакция | Стандартен |
| Вид на продукта | PCR Master Mix (2×) |
Инструкции
1.Реакционна система
| Компоненти | Размер (μL) |
| Шаблонна ДНК | Подходящо |
| Праймер 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Праймер 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | До 50 |
2.Протокол за усилване
| Цикли стъпки | Температура (°C) | време | Цикли |
| Предварителна денатурация | 94 ℃ | 5 минути | 1 |
| Денатурация | 94 ℃ | 30 сек | 35 |
| Отгряване | 50-60 ℃ | 30 сек | |
| Разширение | 72 ℃ | 30-60 сек/kb | |
| Окончателно разширение | 72 ℃ | 10 минути | 1 |
Бележки:
1) Използване на шаблон: 50-200 ng геномна ДНК;0.1-10 ng плазмидна ДНК.
2) Mg2+концентрация: Този продукт съдържа 3 mM MgCl2, подходящ за повечето PCR реакции.
3) Температура на отгряване: Моля, вижте теоретичната стойност на Tm на праймерите.Температурата на отгряване може да бъде настроена на 2-5 ℃ по-ниска от теоретичната стойност на грунда.
4) Време за удължаване: За молекулярна идентификация се препоръчват 30 sec/kb.За генно клониране, 60sec/kb се препоръчва.
Бележки
1.За вашата безопасност и здраве, моля, носете лабораторни престилки и ръкавици за еднократна употреба при работа.
2.Само за изследователска употреба!
