Алкална фосфатаза (ALP)
Описание
Алкалната фосфатаза е получена от рекомбинантен щам на Е. coli, който носи гена TAB5.Ензимът катализира дефосфорилирането на 5' и 3' краища на ДНК и РНК фосфомоноестери.Освен това хидролизира рибозата, както и дезоксирибонуклеозид трифосфатите (NTPs и dNTPs).Алкалната фосфатаза TAB5 действа върху 5' изпъкнали, 5' вдлъбнати и тъпи краища.Фосфатазата може да се използва в много приложения на молекулярната биология, като клониране или маркиране на края на сондата за отстраняване на фосфорилираните краища на ДНК или РНК.При експерименти за клониране дефосфорилирането предотвратява самолигирането на линеаризираната плазмидна ДНК.Той може също да разгради невключени dNTPs в PCR реакции, за да подготви шаблон за секвениране на ДНК.Ензимът е напълно и необратимо инактивиран чрез нагряване при 70°C в продължение на 5 минути, като по този начин прави отстраняването на фосфатазата преди лигиране или крайно маркиране ненужно
Използване
1. Алкалната фосфатаза, свързана с протеини (антитела, стрептавидин и т.н.), може специфично да идентифицира целевите молекули и може да се използва в ELISA, WB и хистохимично откриване;
2. Алкалната фосфатаза може да се използва за дефосфоризиране на 5'-терминала на ДНК или РНК, за да се предотврати самосвързването;
3. Горната дефосфорилирана ДНК или РНК може да бъде белязана с радиомаркирани фосфати (чрез Т4 полинуклеотидна киназа)
Химическа структура
Спецификация
| Тестови елементи | Спецификации |
| Ензимна активност | 5U/μL |
| Ендонуклеазна активност | Не е открит |
| Екзонуклеазна активност | Не е открит |
| Изрязване на дейност | Не е открит |
| РНКазна активност | Не е открит |
| E.coli ДНК | ≤1 копие/5U |
| Ендотоксин | LAL-тест, ≤10EU/mg |
| Чистота | ≥95% |
Транспорт и съхранение
Транспорт:Околна среда
Съхранение:Съхранявайте при 2-8°C
Препоръчва се повторен тестживот:2 години
