Комплект за извличане на вирусна ДНК/РНК
Този комплект е подходящ за бърза екстракция на вирусна ДНК/РНК с висока чистота от проби като назофарингеални тампони, тампони от околната среда, супернатанти от клетъчни култури и супернатанти от тъканен хомогенат.Комплектът е базиран на технология за пречистване на силициева мембрана, която елиминира необходимостта от използване на органични разтворители фенол/хлороформ или отнемащо време алкохолно утаяване за извличане на вирусна ДНК/РНК с високо качество.Получените нуклеинови киселини са без примеси и са готови за използване в експерименти надолу по веригата, като обратна транскрипция, PCR, RT-PCR, PCR в реално време, следващо поколение секвениране (NGS) и Northern blot.
Условия за съхранение
Съхранявайте при 15 ~ 25 ℃ и транспортирайте при стайна температура
Компоненти
| Компоненти | 100RXNS |
| Буфер VL | 50 мл |
| Буфер RW | 120 мл |
| Без РНКаза ddH2 O | 6 мл |
| FastPure РНК колони | 100 |
| Епруветки за събиране (2 ml) | 100 |
| Епруветки за събиране без РНКаза (1,5 ml) | 100 |
Буфер VL:Осигурете среда за лизис и свързване.
Буфер RW:Отстранете остатъчните протеини и други примеси.
ddH2O без РНКаза:Елуирайте ДНК/РНК от мембраната във въртящата се колона.
FastPure РНК колони:Специфично адсорбират ДНК/РНК.
Епруветки за събиране 2 ml:Съберете филтрата.
Епруветки за събиране без РНКаза 1,5 ml:Съберете ДНК/РНК.
Приложения
Назофарингеални тампони, тампони от околната среда, супернатанти от клетъчни култури и супернатанти от тъканен хомогенат.
Самоподготвен Матерials
Накрайници за пипети без РНКаза, 1,5 ml центрофужни епруветки без РНКаза, центрофуга, вортекс миксер и пипети.
Експериментален процес
Изпълнете всички от следните стъпки в шкаф за биобезопасност.
1. Добавете 200 μl от пробата към центрофужна епруветка без РНКаза (допълнете с PBS или 0,9% NaCl в случай на недостатъчна проба), добавете 500 μl буфер VL, разбъркайте добре чрез завихряне за 15 – 30 секунди и центрофугирайте за кратко, за да съберете сместа на дъното на епруветката.
2. Поставете колони FastPure RNA в колекторни епруветки от 2 ml.Прехвърлете сместа от Стъпка 1 в колони FastPure RNA, центрофугирайте при 12 000 rpm (13 400 × g) за 1 минута и изхвърлете филтрата.
3. Добавете 600 μl буфер RW към FastPure RNA колони, центрофугирайте при 12 000 rpm (13 400 × g) за 30 секунди и изхвърлете филтрата.
4. Повторете стъпка 3.
5. Центрофугирайте празната колона при 12 000 rpm (13 400 × g) за 2 минути.
6. Внимателно прехвърлете колоните FastPure RNA в нови колекторни епруветки без РНКаза 1,5 ml (предоставени в комплекта) и добавете 30 – 50 μl свободен от РНКаза ddH2O към центъра на мембраната, без да докосвате колоната.Оставете да престои на стайна температура за 1 минута и центрофугирайте при 12 000 rpm (13 400 × g) за 1 минута.
7. Изхвърлете колоните FastPure RNA.ДНК/РНК може да се използва директно за последващи анализи или да се съхранява при -30~ -15°C за кратък период или -85 ~-65°C за по-дълъг период.
Бележки
Само за изследователска употреба.Не се използва при диагностични процедури.
1. Предварително уравновесете пробите до стайна температура.
2. Вирусите са силно заразни.Моля, уверете се, че са взети всички необходими предпазни мерки преди експеримента.
3. Избягвайте многократно замразяване и размразяване на пробата, тъй като това може да доведе до разграждане или намален добив на извлечената вирусна ДНК/РНК.
4. Самостоятелно приготвеното оборудване включва накрайници за пипети без РНКаза, 1,5 ml центрофужни епруветки без РНКаза, центрофуга, вортекс миксер и пипети.
5. Когато използвате комплекта, носете лабораторна престилка, латексови ръкавици за еднократна употреба и маска за еднократна употреба и използвайте консумативи без RNase, за да сведете до минимум риска от замърсяване с RNase.
6. Изпълнете всички стъпки при стайна температура, освен ако не е указано друго.
Механизъм и работен процес
