2×PCR супер микс (с багрило)
2× PCR Master Mix съдържа Taq ДНК полимераза, dNTPs и други необходими за PCR компоненти.Основният микс е стабилен за 3 месеца при 4 ℃ с нашите персонализирани стабилизатори.Разтворът за предварително смесване е оптимизиран за конвенционален PCR и готов за употреба чрез добавяне на ДНК шаблон и праймери.PCR продуктите могат да бъдат заредени директно за електрофореза с предварително заредено бромофенол синьо багрило.Амплифицираните продукти съдържат 3'-dA издатина и могат лесно да бъдат клонирани в Т вектор.2×PCR Master Mix опростява PCR процедурата и намалява замърсяването.
Условия за съхранение
Продуктите трябва да се съхраняват при -25 ℃ ~ -15 ℃ в продължение на 2 години.
Спецификации
Верност (срещу Taq) | 1× |
Горещ старт | No |
Надвес | 3'-A |
Полимераза | Taq ДНК полимераза |
Формат на реакцията | SuperMix или Master Mix |
Скорост на реакция | Стандартен |
Вид на продукта | PCR Master Mix (2x) |
Инструкции
1.Реакционна система
Компоненти | Сила на звука(μL) |
Шаблонна ДНК | Подходящо |
Праймер 1 (10 μmol/L) | 2 |
Праймер 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | до 50 |
2.Протокол за усилване
Цикли стъпки | Температура (°C) | време | Цикли |
Първоначална денатурация | 94 | 5 минути | 1 |
Денатурация | 94 | 30 сек | 35 |
Отгряване | 50-60 | 30 сек | |
Разширение | 72 | 30-60 сек/kb | |
Окончателно разширение | 72 | 10 мин | 1 |
Забележка:
1) Използване на шаблон: 50-200 ng геномна ДНК;0.1-10 ng плазмидна ДНК.
2) Mg2+концентрация: Този продукт съдържа 3mM MgCl2, подходящ за повечето PCR реакции.
3) Температура на отгряване: Моля, вижте теоретичната стойност на Tm на праймерите.Температурата на отгряване може да бъде настроена на 2-5 ℃ по-ниска от теоретичната стойност на грунда.
4) Време на удължаване: За молекулярна идентификация се препоръчват 30 sec/kb.За генно клониране се препоръчва 60 sec/kb.
Бележки
1.PCR продуктите с 2× PCR Master Mix не са подходящи за електрофореза с полиакриламиден гел.
2.За вашата безопасност и здраве, моля, носете лабораторни престилки и ръкавици за еднократна употреба при работа.
3.Използва се САМО за изследователска цел!