Bst 2.0 ДНК полимераза (без глицерол, висока плътност)
Bst ДНК полимераза V2 е получена от Bacillus stearothermophilus ДНК полимераза I, която има 5′→3′ ДНК полимеразна активност и силна заместваща активност на веригата, но няма 5′→3′ екзонуклеазна активност.Bst DNA Polymerase V2 е идеално подходяща за изместване на вериги, изотермична амплификация LAMP (Loop mediated isothermal amplification) и бързо секвениране.Тази Bst ДНК полимераза V2 е в състояние да инхибира активността на ДНК полимераза при стайна температура, така че да може да работи и реакционната система да може да бъде формулирана при стайна температура, предотвратявайки неспецифичното усилване и подобрявайки ефективността на реакцията, и тази версия може да бъдат лиофилизирани.В допълнение, той е способен да освобождава своята активност при повишени температури, като по този начин елиминира необходимостта от отделна стъпка на активиране.
Компоненти
Компонент | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst ДНК полимераза V2 (без глицерол) (32U/μL) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
10×HC Bst V2 буфер | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
MgSO4 (100mM) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Приложения
1.LAMP изотермично усилване
2.Реакция на единично изместване на ДНК верига
3.Високо GC генно секвениране
4.ДНК секвениране на нанограмно ниво.
Условия на съхранение
Транспортиране под 0°C и съхранение при -25°C~-15°C.
Определение на единица
Една единица се определя като количеството ензим, което включва 25 nmol dNTP в неразтворим в киселина материал за 30 минути при 65°C.
Реакция на ЛАМПА
Компоненти | 25 μLСистема |
10×HC Bst V2 буфер | 2,5 μL |
MgSO4 (100mM) | 1,5 μL |
dNTPs (10mM всеки) | 3,5 μL |
SYTO™ 16 зелен (25×)a | 1,0 μL |
Грунд смесb | 6 μL |
Bst ДНК полимераза V2 (без глицерол) (32 U/uL) | 0,25 μL |
Шаблон | × μL |
ddH2O | До 25 μL |
Бележки:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): Според експерименталните нужди могат да се използват други багрила като заместители;
2) б.Праймерна смес: получена чрез смесване на 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB и други обеми.
Реакция и състояние
1 × HC Bst V2 буфер, температурата на инкубация е между 60°C и 65°C.
Топлинно инактивиране
80°C, 20 минути.