Рназа А
Рибонуклеаза A (RNaseA) е едноверижен полипептид, съдържащ 4 дисулфидни връзки с молекулно тегло около 13,7 kDa.РНКаза A е ендорибонуклеаза, която специфично разгражда едноверижна РНК при C и U остатъци.По-конкретно, разцепването разпознава фосфодиестерната връзка, образувана от 5'-рибозата на нуклеотида и фосфатната група на 3'-рибозата на съседния пиримидинов нуклеотид, така че 2,3'-цикличните фосфати се хидролизират до съответните 3 'нуклеозидни фосфати (напр. pG-pG-pC-pA-pG се разцепва от РНКаза А, за да генерира pG-pG-pCp и A-PG).РНКаза А е най-активна при разцепването на едноверижна РНК.Препоръчителната работна концентрация е 1-100 μG/mL, съвместима с различни реакционни системи.Ниска концентрация на сол (0-100 mM NaCl) може да се използва за разрязване на едноверижна РНК, двойноверижна РНК и РНК вериги, образувани от РНК-ДНК хибридизация.
Въпреки това, при висока концентрация на сол (≥0,3 M), РНКаза А разцепва специфично само едноверижна РНК.
РНКаза А най-често се използва за отстраняване на РНК по време на подготовката на плазмидна ДНК или геномна ДНК.Независимо дали ДНКазата е активна по време на процеса на приготвяне, може лесно да повлияе на реакцията.Традиционният метод на кипене във водна баня може да се използва за инактивиране на ДНКазната активност.Този продукт не съдържа ДНКаза и протеаза и не изисква термична обработка преди употреба.В допълнение, този продукт може да се използва и в експерименти по молекулярна биология, като анализ на защита на РНКаза и анализ на РНК последователност.
Условия за съхранение
Продуктът трябва да се съхранява при -25 ℃ ~ - 15 ℃ в продължение на 2 години.
Спецификации
| Външен вид | Прах |
| Количество | 100mg / 1g |
| Вид на продукта | РНКаза А |
Инструкции
Това е един от обичайните методи за приготвяне на разтвор за съхранение на RNase A.Може и да се приготвичрез други методи съгласно традиционните методи в лабораторията или справочната литература (като напрдиректно разтваряне в 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 или разтвор на Tris-NaCl)
1. Използвайте 10 mM натриев ацетат (рН 5,2), за да приготвите 10 mg/mL разтвор за съхранение на РНКаза А.
2. Загряване при 100 ℃ за 15 минути.
3. Охладете до стайна температура, добавете 1/10 обем от 1 М Tris-HCl (рН 7,4), регулирайте рН до 7,4 (занапример, добавете 500 mL от 10 mg/mL разтвор за съхранение на РНКаза 1 М Tris-HCl, pH7.4).
4. Подопаковани при -20 ℃ за съхранение в замразено състояние, което може да бъде стабилно до 2 години.
[Бележки]:
При кипене на разтвор на РНКаза при неутрални условия ще се образува утайка от РНКаза;Сварете го при по-ниско pH и ако има утаяване, може да се наблюдава, което може да се дължи на наличието на протеинови примеси.Ако се открие утайка след кипене, примесите могат да бъдат отстранени чрез високоскоростно центрофугиране (13000rpm) и след това да се опаковат за съхранение в замразяване.
Бележки
Моля, носете необходимите ЛПС, като лабораторна престилка и ръкавици, за да гарантирате вашето здраве и безопасност.
