Ultra Nuclease GMP клас
Каталожен номер: HC2016A
UltraNuclease GMP клас се експресира и пречиства в Escherichia coli (E.coli) чрез генетично инженерство и се приготвя в GMP среди.Може да намали вискозитета на клетъчния супернатант и клетъчния лизат при научни изследвания, да увеличи ефективността на пречистване на протеини и да подобри функционалните изследвания на протеините.Продуктът може също така да намали остатъците от нуклеинови киселини на гостоприемника до pg-градус, подобрявайки ефективността и безопасността на биологични продукти за приложения, включително пречистване на вируси, производство на ваксини и фармацевтично производство на протеини/полизахариди.Освен това, продуктът може да се прилага и за предотвратяване на слепването на човешки мононуклеарни клетки от периферна кръв (PBMC) при клетъчна терапия и разработване на ваксини.
UltraNuclease се предлага под формата на стерилизиран реагент, елуиран в буфер (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% глицерин), с вид на безцветна, прозрачна течност.Този продукт е произведен съгласно изискванията на GMP процес и се предоставя в течна форма.
Компоненти
UltraNuclease GMP клас (250 U/μL)
Условия за съхранение
Продуктът се доставя със сух лед и може да се съхранява при -25℃~-15°C две години.
Ако продуктът е отворен и е бил съхраняван при 4℃ повече от седмица, препоръчваме филтриранепродуктът за предотвратяване на микробно замърсяване.
Спецификации
| Хост на израза | Рекомбинантна E. coli с UltraNuclease ген |
| Молекулно тегло | 26,5 kDa |
| соелектрическа точка | 6,85 |
| Чистота | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Буфер за съхранение | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% глицерин |
|
Определение на единица | Дефиницията на една единица активност (U) е количеството ензим, използван запроменете стойността на абсорбция на ΔA260 с 1,0 за 30 минути в 2,625 mlреакционна система при 37 ℃ с pH 8,0 (еквивалентно на пълно разграждане на37 μg ДНК на спермата на сьомга в олигонуклеотиди). |
Инструкции
1. Проба колекция
Прилепнали клетки: отстранете средата, промийте клетките с PBS и отстранете супернатантата.
Суспензионни клетки: събирайте клетките чрез центрофугиране, промивайте клетките с PBS, центрофугирайте при 6000обороти в минута за 10 минути, събирайте пелетата.
Ешерихия коли: съберете бактериите чрез центрофугиране, промийте веднъж с PBS, центрофугирайте при 8000обороти в минута за 5 минути и събирайте пелетата.
2. Третиране на пробата
Третирайте събраните клетъчни пелети с лизисен буфер в съотношение на маса (g) към обем (mL) 1:(10-20) или чрез механични или химични методи върху лед или при стайна температура (1 g клетъчна пелета съдържа около
109 клетки).
3. Ензимно лечение
Добавете 1-5 mM MgCl към реакционната система и коригирайте pH до 8-9.
Добавете UltraNuclease в съотношение 250 единици, за да смилате 1 g клетъчни пелети, инкубирайте при 37 ℃ за повече от 30 минути.Моля, вижте формуляра „Препоръчително време за реакция“, за да изберетепродължителност на лечението.
4. Супернатант колекция
Центрофугирайте при 12 000 rpm за 30 минути и съберете супернатантата.
Забележка: Ако разтворът е кисел или алкален, или съдържа високи концентрации на сол, детергенти илиденатуранти, моля, увеличете дозата на ензима или съответно удължете времето за лечение.
Препоръчителни условия за реакциявключвания
| Параметър | Оптимално състояние | Ефективен балсам |
| Mg²+Концентрация | 1-5 тМ | 1-10 тМ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| температура | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT концентрация | 0-100 тМ | >0 тМ |
| Концентрация на меркаптоетанол | 0-100 тМ | >0 тМ |
| Концентрация на едновалентни катиони | 0-20 тМ | 0-150 тМ |
| Фосфатна концентрация | 0-10 тМ | 0-100 тМ |
Препоръчва се реакция време (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Количество UltraNuclease (крайна концентрация) | Време за реакция |
| 0,25 U/mL | >10 ч |
| 2,5 U/mL | >4ч |
| 25 U/mL | 30 мин |
Бележки:
Моля, носете необходимите ЛПС, като лабораторна престилка и ръкавици, за да гарантирате вашето здраве и безопасност!
